Kas yra bakteriologiniai tyrimai? Pagal kokią schemą tai vykdoma? Ką šiuo atveju reiškia saugumas? Kokie yra bakteriologinių tyrimų tikslai ir etapai?
Bendra informacija
Bakteriologinis tyrimas – tai mokslinis procesas, kurio metu nustatomos bakterijos ir tiriamos jų savybės, siekiant nustatyti mikrobiologinę diagnozę. Čia labai svarbu nustatyti susidariusio mikroorganizmo tipą arba rūšį (numanoma grynoji kultūra). Tai lydi organizmų biocheminių ir fiziologinių savybių, taip pat polinkio formuotis toksinams tyrimas. Šiems tikslams naudojamos nusodinimo ir agliutinacijos reakcijos. Taip pat praktikuojama užkrėsti laboratorinius gyvūnus, vėliau aptikus patologinius pokyčius.
Darbas su bandomąja medžiaga
Bakteriologinio tyrimo algoritmas numato griežtą specialių nurodymų laikymąsi. Taigi tiriamoji medžiaga turi būti surenkama į sterilius indus aseptinėmis sąlygomis. Taip pat būtina rūpintisužtikrinti kuo greitesnį pristatymą į laboratoriją. Pageidautina, kad mėginiai būtų laikomi š altai. Bakteriologinio tyrimo technika numato daugybę galimų situacijų. Taigi dėl objekto tipo, mikroorganizmo savybių ir ligos pobūdžio dažnai reikia parengti individualias darbo instrukcijas. Darbe naudojama daug įvairių metodų. Viena iš labiausiai paplitusių yra bakterioskopija. Bet jei bakterijos nefiksuotos, tada naudojamas susmulkintas arba kabantis lašas. Reikėtų pažymėti, kad paskutinėms dviem galimybėms būdingas padidėjęs užkrečiamumo lygis.
Bakterioskopija
Šiuo atveju naudojami potėpiai. Norėdami juos sukurti, ant stiklelio paviršiaus reikia paskirstyti lašelį tiriamo skysčio. Zatesas turėtų jį išdžiovinti. Tai dažnai daroma perkeliant vaistą per liepsną, gautą iš dujų degiklio. Nors fiksavimo mišiniai gali būti naudojami kaip alternatyva. Norint nurodyti, kad su šiuo preparatu buvo atlikti parengiamieji veiksmai, jis nudažytas. Tokio manipuliavimo tikslas yra tikslumas, kuris yra labai svarbus atliekant mikroskopinį ir bakteriologinį tyrimą. Galų gale, jei pakartotinai naudosite vaistą kitam tikslui, gausite košę, su kuria bus labai sunku efektyviai dirbti.
Kodėl bakterioskopija tokia populiari
Ne mažiau svarbu dėl šio metodo prieinamumo. Jei atliekamas bakteriologinis šviežio preparato tyrimas, tada nustatyti patogenągali būti naudojamos mikrocheminės reakcijos arba selektyvus įvairių struktūrinių mikroorganizmo dalių dažymas. Kuris yra geresnis? Tikslesnį rezultatą galima gauti dirbant su spalvotu preparatu. Šiuo atveju tiriamoji medžiaga uždedama ant iš anksto paruošto stiklelio. Ir būtinai plonu (o jei įmanoma) sluoksniu. Po to turite palaukti, kol vaistas išdžius ore. Tada mikroorganizmai fiksuojami vienu iš įprastų metodų. Po to atvėsintas preparatas dažomas diferencialiniais arba paprastais dažais. Tam galima naudoti sausus ir natūralius preparatus. Po to belieka nukreipti ultravioletinius arba trumpus mėlynus spindulius į organizmų kaupimosi vietą, dėl kurios švyti visas mikrobas ar tam tikros jo kūno dalys.
Praktinis bakterioskopijos taikymas
Jis naudojamas diagnozuojant daugybę infekcinių ligų. Garsiausios iš jų yra tuberkuliozė, gonorėja ir pasikartojantis karščiavimas. Be to, jie imasi tyrimų, norėdami ištirti visą organo ar produkto mikrofloros kompleksą. Tačiau kritikai dažnai atkreipia dėmesį į santykinį šio metodo nepatikimumą ir netikslumą.
Bakterijų kultūrų pasėliai ir subkultūros
Atlikite juos naudodami Pasteur pipetę. Bakteriologinį ir citologinį tyrimą dažnai sunku atlikti be inokuliacijos ir subkultūros darbo eigos metu. Dirbant su Pasteur pipete, jos galiukasnulaužti pincetu. Tada pats įrankis pernešamas per degiklio liepsną ir leidžiama atvėsti. Beje, sėjai gali būti naudojamos ir skystos, ir kietos maistinės terpės. Pasirinkimui įtakos turi tai, kokių bakteriologinių tyrimų tikslų siekiama. Tuo pačiu metu būtina laikytis darbo algoritmo ir saugos priemonių. Taigi, dirbant su skysta maistine terpe, būtina užtikrinti, kad ji neišsilietų ir nesušlaptų kamštelio ir mėgintuvėlių kraštų. Kai tyrimas atliekamas su kieta medžiaga, į kultūrą dažnai įvedama speciali adata. Atliekant sėjimą ir persėjimą, jie turi būti atliekami šalia dujinio degiklio liepsnos. Eksperimento grynumo sumetimais mėgintuvėlis neturėtų likti atviras ilgą laiką. Kalbant apie įrankį su kultūra: turėtumėte įsitikinti, kad jis nieko neliečia. Taip pat bakteriologinio tyrimo metodika numato mėgintuvėlio kraštelius apdeginti prieš jį uždarant. Gatavas produktas turi būti pasirašytas iš karto po pagaminimo, kad ateityje būtų išvengta painiavos.
Sėjos efektyvumas
Manoma, kad šis metodas leidžia gauti tikslesnius ir patikimesnius duomenis atliekant bakteriologinę diagnostiką nei anksčiau svarstyta bakterioskopija. Šiuo atveju veiksmų algoritmas yra toks:
- Iš pradžių maistinės terpės paviršius užtepamas gryna kultūra, kuri supilama į Petri lėkštelę.
- Pirminė sėja turėtų būti atliekama rūšiai palankiomis sąlygomismikroorganizmai.
- Po dienos ar dviejų, esant optimaliai aplinkai, visos tinkamos kolonijos persikelia ten, kur gali vystytis maksimaliai. Tai išlaisvina juos nuo pašalinės mikrofloros.
Galutinis rezultatas – vienalyčių bakterijų kultūra, kurią galima identifikuoti.
Grynos kultūros
Bet kaip jie gaminami? Tam naudojami biologiniai ir mechaniniai metodai. Pirmuoju atveju didelį vaidmenį atlieka maistinės terpės, kuriose yra būtinos sąlygos, palankios konkrečiai kultūrai vystytis. Metodas taip pat gali būti taikomas, kai užsikrečia tam tikro tipo bakterijoms jautrūs laboratoriniai gyvūnai. Mechaniniai metodai yra pagrįsti sterilaus instrumento, kuriuo kultūra dedama į maistinę terpę, esančią pirmoje, antroje ir trečioje Petri lėkštelėse, naudojimu. Tada reikia palaukti, kol išaugs atskiros kolonijos, ir iš jų jau išsiskirs grynoji kultūra. Bakterijas galima auginti ir specialiuose termostatuose, kur palaikoma tam tikra temperatūra (dažniausiai apie 37 laipsnius). Tokiu atveju procesas tęsiasi apie dieną. Tačiau, atsižvelgiant į mikroorganizmų tipą, gali būti nustatyti kiti terminai. Taip pat svarbu, kad būtų reikalinga deguonies koncentracija. Norėdami tai padaryti, naudokite įvairius vėdinimo būdus. Iki šiol kalbėjome apie situaciją kaip visumą ir apskritai, bet dabar sutelkime dėmesį į tai, kokia yra bakteriologinių tyrimų schema.
Praktika
Patogeniniams mikroorganizmams paciento ar galimo nešiotojo organizme aptikti dažnai naudojamas metodų rinkinys. Naudojamos medžiagos ir metodai priklauso nuo analizės tikslų, taip pat nuo aplinkos, kurioje atliekamas darbas, sąlygų. Praktikoje dažniausiai bakterijos aptinkamos per kraujo kultūras, paimtas iš žmogaus ar gyvūno. Jei vietiniai pažeidimai yra gerai apibrėžti, patogenų galima ieškoti probleminėse vietose. Tai būdinga tokiems negalavimams kaip dizenterija, gonorėja, difterija ir daugelis kitų. Ypač sunkiais atvejais šis procesas skirstomas į atskirus bakteriologinio tyrimo etapus (tai būdinga vidurių šiltinei). Kiekvienas iš jų naudoja savo metodus, kuriais siekiama nustatyti infekcijos priežastį. Pažvelkime į situaciją su vidurių šiltine. Pirmąją ligos savaitę patikimiausias būdas diagnozuoti ligą – kraujo pasėliai. Antra, tokiu laikomas serologinis tyrimas. Trečią savaitę tiriamos išmatos. Paskutinis metodas laikomas sveikstančiųjų patikrinimu.
Mikroorganizmų identifikavimas
Tai prasideda nuo dažymo proceso. Tada jie žiūri, kaip bakterija gali skaidyti angliavandenius, aminorūgštis ir pan. Be to, šis procesas gali būti papildytas kitų savybių, kurias turi kiekviena atskira mikroorganizmų gentis ar rūšis, tyrimas. Kaip pavyzdį reikėtų pateikti įvairių gyvūnų eritrocitų tirpinimo galimybes, poveikį kraujo plazmos krešėjimui ir krešulių tirpimui.fibrinas ir pan. Visa tai yra atskirų mikropasaulio atstovų skirtumai. Be to, serologinis identifikavimas gali būti naudojamas galutiniam atpažinimui (tačiau dažniausiai tai susiję su patogeninėmis bakterijomis, priklausančiomis žarnyno šeimai).
Išvada
Pažymėtina, kad kai kurių mikroorganizmų negalima nustatyti straipsnyje aprašytais metodais. Šiuo atveju plačiai taikoma laboratorinių gyvūnų užkrėtimo praktika. Skaičiuojama atsižvelgiant į tai, kad atsiras būdingas toksiškumas arba patogeniškumas, kurio dirbtinėmis sąlygomis nepastebima. Infekcija taip pat gali būti naudojama kaip patogeninių mikrobų kaupimosi būdas. Ir jau palyginus tiriamos kultūros charakteristikas, nustatytas tiriant biologines, morfologines, serologines ir biochemines savybes, galima teigti, kad žinoma, su kokiais mikrobais susiduriame. Identifikavimas – tai bakterijos genties, rūšies ir tipo nuoroda. Jei tiriamas mikroorganizmas tam tikromis savybėmis skiriasi nuo jam būdingų savybių, tai turi būti nurodyta. Nemažai ekspertų mano, kad tokiais atvejais bus naudinga pakartotinai identifikuoti visus naudojamus metodus ir metodus. Kartais tyrimai gali būti perkelti į kitą lygį, o tam reikia rimtesnio (ir brangesnio) požiūrio. Jei buvo gauti neigiami rezultatai, tai rodo, kad preparatasmikroorganizmų nebuvo arba jie nebuvo gyvybingi. Bet dėl tyrimų tikslumo, jei įtariama keletas bacilų nešiotojų (dizenterija, difterija, vidurių šiltinė), tokiais atvejais rodomi pakartotiniai patikrinimai. Tai būtina, kad specialistai tiksliai suprastų, su kuo jiems teks susidurti.
