Pastaruoju metu sukurtas patikimas, itin jautrus ir greitas įvairių žmogaus infekcinių ligų diagnostikos metodas. Šis metodas vadinamas „PGR analize“. Kas tai yra, kokia jo esmė, kokius mikroorganizmus jis gali atskleisti ir kaip teisingai jį vartoti, papasakosime savo straipsnyje.
Atradimų istorija
1983 m. amerikiečių mokslininkas Kary Mullis išrado polimerazės grandininės reakcijos (PGR) metodą. Iš pradžių diagnostikos metodą užpatentavo Cetus Corporation, kurioje dirbo jo kūrėjas. Tačiau 1992 m. visos teisės ir patentai buvo parduoti Hoffman-La Roche. Po to paaiškėjo, kad panašūs tyrimai buvo atliekami lygiagrečiai ir juos užfiksavo kiti amerikiečių biologai, tokie kaip Alice Chen, David Edgar, John Trell. 1980 metais šią problemą sprendė ir sovietų mokslininkai A. Sliusarenko, A. Kaledinas ir S. Gorodetskis. Todėl buvo neįmanoma nustatyti vienintelio autorių teisių turėtojo. Daugelis žinomų biochemikų įnešė tam tikrą indėlį į polimerazės grandininės reakcijos technikos kūrimą ir užpatentavo savo naujoves. Šiuo metu analizėPGR visur atliekama specialiai įrengtose laboratorijose.
PGR diagnostikos metodo esmė
PGR analizė: kas tai yra ir kaip ji veikia? Metodo esmė – dirbtinėmis sąlygomis, naudojant specialų DNR polimerazės fermentą, padidinti tam tikros mikrobinės aplinkos tūrį. Tam daug kartų padauginama esama DNR medžiaga. Taigi, mėginyje esant patogeniniam mikroorganizmui, jo kiekis padidės dėl biocheminių laboratorinių manipuliacijų, o mikroskopu aptikti bakteriją nebus sunku.
Kaip atliekami medžiagos tyrimai?
Reikalingas analizei:
- DNR matrica;
- gruntai, jungiantys medžiagos gabalo galus;
- karščiui atsparus DNR polimerazės fermentas;
- cheminės medžiagos, dėl kurių fermentai veikia tinkamai;
- buferinis tirpalas, būtinas norint sukurti tinkamas sąlygas DNR medžiagai augti ir vystytis.
Norint atlikti PGR, atliekama 25–30 pakartojimų, susidedančių iš trijų etapų: denatūravimo, atkaitinimo ir pailginimo.
Polimerinės grandininės reakcijos analizei naudojamas specialus prietaisas – stiprintuvas. Šiuolaikinė įranga leidžia nustatyti reikiamą šildymo ir aušinimo vamzdžių programą, kad diagnostikos metu būtų pašalintos klaidos.
Kur naudojama diagnostika?
Polimerinės grandininės reakcijos metodas naudojamas įvairiose medicinos srityse:
- kriminalistai suji identifikuoja genetinę medžiagą, tokią kaip plaukai, seilės arba kraujas;
- PGR kraujo tyrimas padeda nustatyti genotipą, pavyzdžiui, nustatyti individualią genetiškai įgimtą reakciją į tam tikrą vaistą;
- naudojant šį metodą šeimos ryšiams tarp žmonių nustatyti;
- Medicininėje diagnostikoje tapo populiariausiu PGR metodu įvairioms infekcinėms ligoms nustatyti.
Kokias infekcijas aptinka PGR?
Taigi, medicina jau seniai ir sėkmingai taiko PGR analizę. Kas tai yra, mes jau žinome. O kokius patogenus su juo galima aptikti? PGR metodu diagnozuojamos šios infekcinės ligos:
- hepatitas A, B, C;
- ureaplazmozė;
- kandidozė;
- chlamidija;
- mikoplazmozė;
- gardnereliozė;
- infekcinė mononukleozė;
- trichomonozė;
- papilomos viruso infekcija;
- tuberkuliozė;
- 1 ir 2 tipo herpes infekcija;
- helikobakteriozė;
- citomegalovirusas;
- difterija;
- salmoneliozė;
- ŽIV infekcija.
Be to, PGR metodai naudojami diagnozuojant vėžį.
Metodo pranašumai
PGR diagnostika turi keletą privalumų:
- Didelis jautrumas. Net ir esant tik kelioms mikroorganizmo DNR molekulėms, PGR analizė nustato infekcijos buvimą. Metodas padės sergant lėtinėmis ir latentinėmis ligomis. Dažnai tokiais atvejais mikroorganizmaskitaip nedirbama.
- Tyrimui tinka bet kokia medžiaga, pvz., seilės, kraujas, lytinių organų išskyros, plaukai, epitelio ląstelės. Dažniausiai atliekama kraujo ir urogenitalinio tepinėlio analizė PGR.
- Ilgalaikis derlius nereikalingas. Automatizuotas diagnostikos procesas leidžia gauti tyrimo rezultatus po 4-5 valandų.
- Šis metodas yra beveik 100 % patikimas. Užregistruoti tik pavieniai klaidingai neigiami rezultatai.
- Galimybė identifikuoti kelių tipų patogenus iš vieno medžiagos mėginio. Tai ne tik pagreitina ligos diagnozavimo procesą, bet ir žymiai sumažina materialines išlaidas. Dažnai gydytojas skiria išsamią PGR analizę. Tyrimo, kurį sudaro šešių patogenų nustatymas, kaina yra apie 1500 rublių.
Rekomendacijos ruošiantis analizei
Kad PGR tyrimo rezultatai būtų patikimi, turite atlikti testą, vadovaudamiesi rekomendacijomis dėl išankstinio pasiruošimo diagnozei:
- Prieš duodami seilių, turėtumėte nevalgyti ir negerti vaistų likus 4 valandoms iki mėginio paėmimo. Prieš pat procedūrą praskalaukite burną virintu vandeniu.
- Aukščiau pateiktų taisyklių taip pat reikėtų laikytis imant mėginį iš vidinio skruosto paviršiaus. Po skalavimo rekomenduojama atlikti lengvą odos masažą, kad paryškintumėte liaukos sekreciją.
- Šlapimas dažniausiai renkamas namuose. Norėdami tai padaryti, turite atlikti išsamų tualetąlytiniai organai. Surinkite 50-60 ml šlapimo į sterilų plastikinį indą. Siekiant užtikrinti medžiagos grynumą, moterims rekomenduojama į makštį įkišti tamponą, o vyrams kiek įmanoma atitraukti odos raukšlę. Neaukokite mėnesinių metu.
- Norėdami paaukoti spermą, turite susilaikyti nuo lytinių santykių 3 dienas prieš mėginio paėmimą. Medikai taip pat pataria nesilankyti pirtyje ir maudytis karštoje vonioje, gerti alkoholį ir aštrų maistą. Likus 3 valandoms iki tyrimo turite susilaikyti nuo šlapinimosi.
- Norint paimti urogenitalinį tepinėlį, pavyzdžiui, jei PGR tyrimas atliekamas dėl chlamidijų, tiek moterims, tiek vyrams patariama 3 dienas lytiškai pailsėti. Prieš 2 savaites iki analizės negalima vartoti antibakterinių vaistų. Savaitę reikia nustoti naudoti intymius gelius, tepalus, makšties žvakutes, plovimą. Likus 3 valandoms iki tyrimo, turite susilaikyti nuo šlapinimosi. Menstruacijų metu mėginiai neatliekami, tik praėjus 3 dienoms po to, kai nutrūksta kraujo išleidimas, galima paimti urogenitalinės sistemos tepinėlį.
PCR nėštumo metu
Vaikelio laukimosi laikotarpiu daugelis lytiniu keliu plintančių infekcijų yra itin pavojingos normaliam vaisiaus vystymuisi. LPL gali išprovokuoti intrauterinį augimo sulėtėjimą, persileidimą ar priešlaikinį gimdymą, įgimtus vaiko apsigimimus. Todėl labai svarbu ankstyvuoju nėštumo laikotarpiu atlikti PGR tyrimą. Registruojantis būtina išlaikyti analizę - iki 12 savaičių.
Medžiaga paimama iš gimdos kaklelio kanalo naudojant specialų šepetėlį. Procedūra neskausminga ir nekelia pavojaus kūdikiui. Paprastai nėštumo metu PGR metodu atliekama chlamidijų analizė, taip pat ureaplazmozė, mikoplazmozė, citomegalovirusas, herpesas, papilomos virusas. Toks tyrimų kompleksas vadinamas PCR-6.
PGR ŽIV diagnozei
Dėl to, kad polimerazės grandininės reakcijos metodas yra labai jautrus organizmo pokyčiams ir diagnozės sąlygoms, rezultatui įtakos gali turėti daug veiksnių. Todėl PGR analizė ŽIV infekcijai nustatyti nėra patikimas metodas, jos efektyvumas siekia 96–98%. Likusiais 2–4 % atvejų testas duoda klaidingai teigiamus rezultatus.
Tačiau kai kuriais atvejais ŽIV PGR diagnostika yra būtina. Paprastai jis skiriamas žmonėms, kurių ELISA rezultatas yra klaidingai neigiamas. Tokie rodikliai rodo, kad žmogus dar nesusikūrė antikūnų prieš virusą ir jų negalima aptikti daugkartiniam jų skaičiaus padidėjimui. Būtent tai galima pasiekti atlikus PGR kraujo tyrimą.
Ši diagnostika taip pat būtina pirmųjų gyvenimo metų vaikams, gimusiems iš ŽIV užsikrėtusios motinos. Šis metodas yra vienintelis būdas patikimai nustatyti vaiko būseną.
PGR hepatitui diagnozuoti
Polimerazės grandininės reakcijos metodas leidžia aptikti hepatito A, B, C viruso DNR dar gerokai prieš susiformuojant antikūnams prieš infekciją ar pasireiškus ligos simptomams. PGR analizė dėl hepatito C yra ypač efektyvi, nes 85% atvejų ši liga yra besimptomė ir be simptomų.laiku pradėtas gydymas pereina į lėtinę stadiją.
Laiku aptiktas patogenas padės išvengti komplikacijų ir ilgalaikio gydymo.
Išsamus PGR tyrimas
Sudėtinga PGR analizė: kas tai? Tai tyrimas naudojant polimerinės grandininės reakcijos metodą, kurio metu vienu metu nustatomos kelių tipų infekcijos: mycoplasma genitalium, mycoplasma hominis, gardnerella vaginalis, candida, trichomonas, citomegalovirusas, ureaplasma urealiticum, 1 ir 2 tipo herpes, gonorėja, papilomos virusas. Tokios diagnostikos kaina svyruoja nuo 2000 iki 3500 rublių. priklausomai nuo klinikos, naudojamų medžiagų ir įrangos, taip pat nuo analizės tipo: kokybinė ar kiekybinė. Ko reikia Jūsų atveju – nuspręs gydytojas. Kai kuriais atvejais pakanka tik nustatyti patogeno buvimą, kitais, pavyzdžiui, užsikrėtus ŽIV, svarbų vaidmenį atlieka kiekybinis titras. Diagnozuojant visus aukščiau išvardintus patogenus, tyrimas vadinamas „PGR-12 analize“.
Analizės rezultatų nuorašas
Iššifruoti PGR analizę nėra sunku. Rodiklio yra tik 2 skalės – „teigiamas rezultatas“ir „neigiamas rezultatas“. Nustačius patogeną, gydytojai gali 99% tikrumu patvirtinti ligos buvimą ir pradėti gydyti pacientą. Taikant kiekybinį infekcijos nustatymo metodą, atitinkamame stulpelyje bus nurodytas skaitinis aptiktų bakterijų rodiklis. Tik gydytojas gali nustatyti ligos mastą ir paskirti reikiamą gydymą.
Kai kuriais atvejais, pavyzdžiui, nustatant ŽIV infekciją PGR metodu, esant neigiamam rezultatui, reikia atlikti papildomus tyrimus, kad būtų patvirtinti gauti rodikliai.
Kur pasitikrinti?
Kur atlikti PGR testą: valstybinėje klinikoje ar privačioje laboratorijoje? Deja, savivaldybių gydymo įstaigose įranga ir metodai dažnai yra pasenę. Todėl geriau teikti pirmenybę privačioms laboratorijoms su modernia įranga ir aukštos kvalifikacijos personalu. Be to, privačioje klinikoje rezultatų pasieksite daug greičiau.
Maskvoje daugelis privačių laboratorijų siūlo įvairių infekcijų PGR analizę. Pavyzdžiui, tokiose klinikose kaip Vita, Complex Clinic, Happy Family, Uro-Pro, atliekama PGR analizė. Tyrimo kaina nuo 200 rublių. vienam patogenui nustatyti.
Galima daryti išvadą, kad infekcinių ligų diagnostika PGR metodu daugeliu atvejų yra greitas ir patikimas būdas aptikti patogeną organizme ankstyvose infekcijos stadijose. Tačiau vis tiek tam tikrais atvejais verta rinktis kitus diagnostikos metodus. Tik specialistas gali nustatyti tokio tyrimo poreikį. PGR analizės iššifravimas taip pat reikalauja profesionalaus požiūrio. Laikykitės gydytojo patarimų ir nedarykite jums nereikalingų tyrimų.
