Prieimplantacinės genetinės diagnostikos metodas naudojamas embriono, gauto apvaisinimo mėgintuvėlyje būdu, sveikatos būklei įvertinti prieš implantavimą į gimdos ertmę. Metodas leidžia ne tik išsirinkti sveiką būsimą kūdikį, bet ir padidinti nėštumo tikimybę. Ši technika plačiai naudojama visose pasaulio klinikose, kuriose dalyvauja apvaisinimas in vitro.
Bendrosios sąvokos
Genetinė diagnozė prieš implantaciją leidžia atlikti išsamų tyrimą ir atmesti chromosomų anomalijų buvimą apskritai arba bet kurį konkretų nukrypimą. Pastaruoju metu lygiagrečiai su ankstyvais defektais tikrinami genai, galintys išprovokuoti auglių atsiradimą suaugus (kiaušidžių, žarnyno, krūtų).
Esant genominių ligų nešiotojui iš motinos pusės, dar prieš apvaisinimą atliekama kelių poliarinių kiaušinėlio kūnų biopsija. Aprašyti metodai yra ankstyvos prenatalinės diagnostikos alternatyva, leidžianti įspėti apie abortą, jei vaisius staiga turi genetinių patologijų.
Priešimplantacinė genetinė diagnostika leidžia nustatyti būsimo kūdikio lytį jau atrankos metu. Tai naudojama siekiant užkirsti kelią su lytimi susijusių anomalijų vystymuisi.
Kaip paveldimos genetinės ligos
Atskirkite paveldimas patologijas, atsiradusias pagal dominuojantį, recesyvinį ir su x susietą tipą.
| Paveldėjimo tipas | Funkcijos | Rizika susilaukti sergančio kūdikio |
| Dominuojantis | Vienas iš partnerių turi vieną pažeistą geną, kuris dominuoja jų poroje | 50% paveldi geną |
| Recesyvinis | Abu partneriai turi tą patį defektinį geną, bet turi normalią porą | 50 % tampa nešiotoju, 25 % susirgo liga |
| X susietas | Moterys yra apsaugotos nuo patologijos dėl savo chromosomų rinkinio ir yra išskirtinai nešiotojos. Vyrams būdinga anomalija | vyras turi 50% galimybę paveldėti geną ir ligą, moteris turi galimybę tapti nešiotoja kaip jos mama - 50% |
Kas peržiūrimas?
Priešimplantacinė genetinė diagnostika (PGD) atliekama šiais atvejais:
- Vienos ar abiejų paveldimų ligų buvimas arba kariotipo pokyčiai. Dažnai patys partneriaižino apie savo problemas, rečiau sužino atrankos metu.
- Pasikartojantis persileidimas. To problema yra ne tėvų anomalijos (jų gali ir nebūti), o genetinės vaisiaus mutacijos, sukeliančios persileidimus.
- Asmenų, kuriems taikoma IVF programa, amžius yra vyresnis nei 38 metai.
- Daugiau nei 3 nesėkmingų IVF bandymų istorija.
- Vyrų nevaisingumas.
- ICSI (intracitoplazminė spermos injekcija) įtraukimas į apvaisinimo programą. Šis procesas yra kupinas genetinių embriono anomalijų vystymosi.
- Hidatidiforminio apgamo istorija.
PGD funkcijos
Moksliniai tyrimai preimplantacinės genetinės diagnostikos srityje rodo, kad metodas turi teisę egzistuoti, padeda diagnozuoti ir užkirsti kelią chromosomų anomalijoms, tačiau jį reikia toliau tobulinti.
PGD funkcijos yra šios:
- Persileidimų dažnis atliekant patikrą yra mažesnis nei be patikros;
- šiuo metu nėra įrodymų, kurie padidintų nėštumo tikimybę;
- yra klaidingo rezultato tikimybė: embrionas sveikas, bet rezultate rodomi nukrypimai, embrionas serga, bet tyrimas teigia kitaip (5-10% atvejų).
Priešimplantacinė genetinė diagnozė (blastomerų tyrimas)
Sudarius susitarimą dėl apvaisinimo mėgintuvėlyje, reprodukcijos specialistas įvertina poreikįPGD susituokusiai porai. Jei nurodyta, partneriai gali susitarti arba atsisakyti procedūros. Tada pasirašomas dokumentas, patvirtinantis leidimą atlikti apklausą.
Trečią dieną po embriono apvaisinimo genetikas paima vieną iš susidariusių blastomerų ląstelių analizei. Manoma, kad tai neturi jokių pasekmių vaisiui, nes visos ląstelės yra keičiamos.
Specialistas atlieka tyrimus vienoje iš anksčiau pasirinktų sričių: tiria ląstelės struktūrą specialiu fluorescenciniu mikroskopu, atlieka DNR tyrimą polimerazės grandininės reakcijos metodu, siekiant nustatyti mutacijos buvimą.
Remiantis rezultatu, embrionai su anomalijomis nebus naudojami implantavimo procese. Pasirinkta sveika ir kokybiška. Tada vienas ar keli iš jų perkeliami į motinos gimdą.
Kai atliekama poliarinio kūno biopsija, tiriama motinos chromosomų rinkinys. Ji atliekama tuo atveju, jei išilgai moteriškos linijos atskleidžiama genetiškai nulemta patologija. Procedūra leidžia nustatyti, ar kiaušinis yra sveikas, kuris bus naudojamas apvaisinti, nepažeidžiant jo struktūros. Jei anomalijų nenustatoma, galima naudoti tręšimui ir pernešimui į gimdos ertmę.
Yra atvejų, kai ekranuojami poliariniai kūnai, o vėliau – blastomerai. Tai leidžia gauti patikimesnį rezultatą. Schemą, pagal kurią bus atliekamas tyrimas, pasirenka specialistasgenetikas.
Naudoti metodai
Skaitiniai ir struktūriniai chromosomų anomalijos nustatomos fluorescencinės hibridizacijos metodu. Šis metodas leidžia nurodyti ląstelės DNR seką. Naudojami specialūs DNR zondai, kurie savo struktūroje yra viena kitą papildančios blastomerų DNR zonų vietos.
Zonde yra nukleotidas ir fluoroforas (molekulė, galinti fluorescencuoti). Po tikslinės DNR sąveikos su DNR zondu susidaro apšviestos sritys, kurios apžiūrimos pro fluorescencinį mikroskopą.
Taip pat naudokite PGR metodą (polimerazės grandininę reakciją). Jį sudaro DNR dalies kopijavimas naudojant fermentus tam tikromis laboratorinėmis sąlygomis.
Aneuploidijos diagnozė
Tai vienas iš priešimplantacinės genetinės diagnostikos metodų, leidžiantis aptikti skaitines chromosomų anomalijas (nustatyti papildomas ar trūkstamas chromosomas).
Genetinę medžiagą sudaro 46 chromosomos, iš kurių pusę duoda tėvas, o kitą pusę motina. Jei embrionas gauna papildomą chromosomą, tai vadinama trisomija, o bet kurios netekimas – monosomija. Dėl šių defektų gali būti:
- embriono implantacijos trūkumas;
- persileidimas;
- paveldimos patologijos (Dauno sindromas, Klinefelterio, Shereshevsky-Turner sindromas).
Vyrų nevaisingumas ir poros amžiusyra dažni tokių anomalijų atsiradimo veiksniai.
Monogeninių patologijų PGD
Embrionų priešimplantacinė genetinė diagnostika, siekiant nustatyti monogeninių ligų buvimą, atliekama šeimose, kuriose nustatytas paveldimų anomalijų buvimas. Jei pora jau turi vienarūše liga sergantį kūdikį, tai galimybė pagimdyti kitą sergantį vaiką padidėja kelis kartus.
Priežastis yra tam tikros DNR dalies chromosomų sekos pažeidimas. Šios ligos apima:
- cistinė fibrozė;
- adrenogenitalinis sindromas;
- fenilketonurija;
- hemofilija;
- pjautuvinė anemija;
- Wernig-Hoffman sindromas.
Metodo nauda ir rizika
Priešimplantacinė genetinė diagnozė, kuri laikoma dviprasmiška, turi tam tikrų pranašumų prenatalinės patikros srityje:
- į gimdą perkeliami tik kokybiški ir sveiki embrionai;
- sumažina riziką susilaukti kūdikio su genetinėmis anomalijomis;
- perpus sumažinti persileidimo riziką;
- daugiavaisio nėštumo rizika sumažėja perpus;
- 10 % didesnė embriono implantavimo tikimybė;
- 20 % didesnė tikimybė sėkmingai pagimdyti kūdikį.
Netyčinio embriono pažeidimo rizika PGD metu yra 1 %. Klaidingo rezultato tikimybė yra 1:10, be to, 3 % tikimybė, kad embrionas su bet kokia anomalija bus įvertintas kaip sveikas.
Tikimybė, kad bus sveikas embrionasnukrypimai - 1:10. 1:5 tikimybė, kad embrionų perkėlimas į gimdos ertmę bus atšauktas dėl kiekviename iš jų rastų anomalijų.
Kontraindikacijos
Prieimplantacinė genetinė diagnozė (PGD), kurios pasekmės embrionui nebuvo aiškiai nustatytos, turi keletą kontraindikacijų atlikti:
- embriono suskaidymas daugiau nei 30% (skaldelių susidarymas iki 25% laikomas norma);
- daugiabranduolių blastomerų buvimas embrione;
- embrionas turi mažiau nei 6 blastomerus trečią jo vystymosi dieną.
Metodo sauga
Diagnozė atliekama ankstyvoje būsimo organizmo kūrimo stadijoje, kai visos jo ląstelės yra pluripotentinės, tai yra iš kiekvienos gali susiformuoti visavertis sveikas organizmas.
Visi vykstantys PGD veiksmai nesukelia laiko embrionui, vaisiui ir negimusiam kūdikiui. Gavus mėginį tyrimams, jis paruošiamas specialiu būdu. Ląstelės dedamos ant stiklelio, ant kurio jos pritvirtinamos, arba į buferinį tirpalą.
Procedūros kaina
Priešimplantacinė genetinė diagnostika, kurios kaina svyruoja nuo 50 iki 120 tūkstančių rublių, iš pirmo žvilgsnio atrodo kaip brangi manipuliacija. Tačiau vaiko, turinčio genetiškai nulemtų patologijų, sveikata ir gydymas kainuos daug brangiau.
Procedūra suteikia visus pranašumus, palyginti su moterimis, kurios galėjo pastoti natūraliaibūdu, nes toks diagnostikos metodas jiems neprieinamas. Priešimplantacinė genetinė diagnostika, kurios kaina yra nereikšminga, palyginti su pačiu apvaisinimu mėgintuvėlyje, yra tik kaip priedas prie bendros programos, leidžiančios ne tik ištverti ir pagimdyti, bet ir užauginti sveiką kūdikį.
