Kraujo agliutinacija – tai raudonųjų kraujo kūnelių, bakterijų ir kitų antigenus pernešančių ląstelių agliutinacija ir nusėdimas.
Procesas vyksta veikiant agliutininams, kurie yra specifinės medžiagos. Lektinai arba antikūnai veikia kaip šios medžiagos.
Galimi agliutinacijos tipai nustatant kraujo grupę
Agliutinacija yra specifinė ir nespecifinė. Pirmuoju atveju reakcija vyksta dalyvaujant trims komponentams:
- antigenai;
- antikūnai;
- elektrolitai (naudokite izotoninį tirpalą).
Nustatant kraujo grupę naudojami visi galimi agliutinacijos tipai, tačiau tai nėra vienintelis atvejis.
Kam tikslui jis naudojamas?
Kraujo agliutinacijos testas naudojamas infekcinės ligos sukėlėjui nustatyti. Tuo pačiu metu jis nusėda ir jį lengva aptikti nuosėdose. Šis procesas, kaip minėta aukščiau, naudojamas nustatant kraujo grupę. Apie tai kalbėsime toliau.
Kokios funkcijos?
Eritrocituose yra A ir B tipo antigenųjungiasi prie antikūnų ά ir β atitinkamai. Kraujo grupės ir agliutinacijos reakcijos:
- 1, 0 (ά, β) - eritrocitų paviršiuje nėra antigenų;
- 2, A (β) – yra antigenas A ir antikūnas β;
- 3, B (ά) – yra antigeno B ir antikūno ά;
- 4, AB (00) – yra du antigenai, nėra antikūnų.
Verta pažymėti, kad antigenai jau yra pastebėti embrione. Kalbant apie antikūnus, jie atsiranda po gimimo, pirmąjį gyvenimo mėnesį.
Žmonių suderinamumas priklauso nuo kraujo grupės. Tai yra priežastis, dėl kurios motinos kūnas atmetė vaisius. Kitaip tariant, ji turi antikūnų prieš negimusio vaiko kraujo antigenus. Tokiu atveju atsiranda nesuderinamumas. Be to, perpilant reikia atsižvelgti į kraujo grupę.
Pasiruošimas
Kraujo grupės ir agliutinacijos reakcijos yra suderinamos sąvokos, kurios dažnai naudojamos medicinoje.
Prieš testą svarbu laikytis tam tikrų nurodymų. Būtina laikinai atsisakyti tam tikrų maisto produktų ir vaistų vartojimo. Tai padės gauti tikslesnius rezultatus. Rekomendacijos, kurių reikia laikytis, nustato gydytojas. Faktas yra tas, kad skirtingose laboratorijose gali būti ne tokie patys gautų verčių diapazonai, ty jie šiek tiek skiriasi.
Bandymo sąlygos
Kad kraujo grupė būtų nustatyta tiksliai, svarbu pasirinkti tinkamą įrangą. Tai apima:
- fiziologinis tirpalas ir pipetė;
- stiklo strypai;
- standartinis izohemagliutinuojantis serumas;
- sausos molio plokštės, suskirstytos į 4 sektorius.
Bandymo sąlygoms keliami reikalavimai:
- dienos šviesa;
- patalpos temperatūra virš +16 ˚С;
- naudojant kraujo ir serumo tūrius santykiu 1:10;
- Patikimi rezultatai per 5 minutes.
Aukščiau pateiktos pagrindinės sąlygos ir įrankiai. Kraujo agliutinacija gali būti atliekama keliais būdais ir kiekvienas iš jų kelia individualius reikalavimus.
Metodai
Galimi kraujo grupės nustatymo metodai naudojant agliutinaciją:
- standartinis metodas;
- kryžminė reakcija;
- tsoliclonų naudojimas;
- ekspresinis metodas naudojant „Erythrotest-Groupcard“rinkinį.
Standartinis metodas
Kraujo agliutinacija pasireiškia naudojant paciento raudonuosius kraujo kūnelius. Taip pat naudojami standartiniai serumai, kuriuose yra žinomų antigenų.
Vienas lašas keturių serumų užlašinamas ant plokščios lėkštelės. Tada stiklinėmis lazdelėmis į jį įvedamas tiriamo paciento kraujas. Šiuo atveju patogu naudoti akių lašintuvus. Santykis turi būti 1:10. Serumas ir kraujas švelniai sumaišomi. Įvertinimą galima atlikti per penkias minutes.
Bandymo rezultatų iššifravimas paprastu metodu
Po nurodyto laikolašeliuose stebimas serumo nušvitimas. Vienuose matote, kad įvyko eritrocitų agliutinacija (maži dribsniai), kitose jos nėra.
Yra šios parinktys:
- jokios reakcijos visuose serumo mėginiuose – 1 grupė;
- krešėjimas atsirado visur, išskyrus 2-ąjį mėginį – 2 grupę;
- nereakcijos tik 3-iame mėginyje - 3-ioje grupėje;
- agliutinacija įvyko visur – 4 grupė.
Taigi, svarbiausia tinkamai paskirstyti serumą. Tada iššifruoti rezultatą nebus sunku. Jei kraujo agliutinacija silpna, rekomenduojama pakartotinai tirti. Esant mažiems dribsniams, jie tiriami mikroskopu.
Kryžminė reakcija
Kartais neįmanoma tiksliai nustatyti kraujo grupės paprastu būdu. Agliutinacija šiuo atveju atliekama naudojant kryžminės reakcijos metodą. Skirtingai nei pirmojoje testo versijoje, čia svarbūs standartiniai eritrocitai. Paciento kraujas surenkamas į mėgintuvėlį, centrifuguojamas, o serumas pipete išpumpuojamas tolesniam tyrimui.
2
Kryžminės reakcijos metodo rezultatai
Po penkių minučių pavyzdžiai paruošti peržiūrėti. Galimos šios parinktys:
- klijavimas įvyko abiejuose lašuose – 1 grupė;
- dribsniai nėranepastebėta nei viename mėginyje – 4 grupė;
- procesas matomas viename mėginyje – 2 arba 3 grupėse (priklausomai nuo to, kur tiksliai krešėjo kraujas).
Coliclon metodas
Norint nustatyti kraujo grupę, tokiu būdu agliutinacija atliekama naudojant sintetinius serumo pakaitalus. Jie vadinami tsoliklonais. Juose yra dirbtinių ά ir β-agliutinų pakaitalų, žinomų kaip eritrotestai (atitinkamai rožinės ir mėlynos spalvos). Reakcija vyksta tarp jų ir paciento raudonųjų kraujo kūnelių.
Šis metodas yra tiksliausias ir patikimiausias. Iš esmės tai nereikalauja pakartotinio tyrimo. Rezultatų vertinimas atliekamas taip pat, kaip ir standartinio metodo atveju. Ypatumas tas, kad ketvirtoji kraujo grupė būtinai turi būti patvirtinta reakcija su konkrečiu sintetiniu pakaitalu (anti-AB). Be to, įpylus natrio chlorido tirpalo, jis nelipna.
Express metodas su „Erythrotest-group“kortelių rinkiniu
Atsižvelgiant į galimus analizės metodus nustatant kraujo grupę, verta paminėti, kad šis metodas turi savo ypatybes. Jos slypi tame, kad rezultatą galima įvertinti ne tik laboratorijoje, bet ir lauke. Tyrimui naudojamas specialus rinkinys. Jame yra šulinio kortelė, kurios apačioje jau yra džiovintų reagentų. Be anti-AB, anti-A ir anti-B, Rh faktoriui nustatyti naudojamas anti-D.
Šis metodas nereikalauja specialaus paruošimo, leidžiama naudoti kraują, paimtą iš piršto, konservantų buvimas jame leidžiamas. Pirmiausia į kiekvieną šulinį reikia įpilti lašelį vandens, kad ištirptų ingredientai. Po to įpilamas kraujas, šiek tiek pamaišomas. Rezultatas bus gautas po trijų minučių.
Klaidinga agliutinacija
Kartais duomenys, gauti po testo, nėra teisingi. Šis reiškinys priklauso nuo tam tikrų veiksnių.
Yra trijų tipų klaidingos reakcijos:
- Pseudoagliutinacija. Tikrasis ryšys nevyksta, eritrocitai tiesiog susilanksto monetų stulpelių pavidalu. Jei įlašinsite porą lašų fiziologinio tirpalo, jie suyra. Panašus reiškinys atpažįstamas ir pro mikroskopą.
- Š alta kraujo agliutinacija. Tokia reakcija stebima, jei tyrimo sąlygos buvo nepalankios. Kai temperatūra žemesnė nei +16˚C, gali susidaryti klijavimas.
- Panagliutinacija. Jei kraujyje yra infekcija, tyrimo rezultatai gali būti klaidingi. Šis reiškinys galimas ir sergant onkologinėmis ligomis, sergant sepsiu.
Agliutinacija yra labai svarbi medicinoje. Tai leidžia ne tik nustatyti kraujo grupę, bet ir nustatyti ligų sukėlėją, taip pat infekcijų buvimą. Svarbiausia yra laikytis gydytojo rekomendacijų ruošiantis šiai procedūrai. Kalbant apie medicinos personalą, jų užduotis yra sudaryti palankias sąlygas irvisų taisyklių laikymasis. Tik taip galima pasiekti tikslių rezultatų atliekant kraujo agliutinaciją.
