Pagal PSO statistiką, per pastaruosius 40 metų nuo AIDS mirė 25 milijonai žmonių. Šios infekcijos žala yra didžiulė. Paaiškėjo, kad dauguma užsikrėtusiųjų yra Afrikoje, iš kur ir kilo ši infekcija. Su ŽIV ligos diagnostika tampa ypač aktuali. Tiesa, vaistų nuo ŽIV dar nėra, tačiau ankstyvas gydymas gali pailginti paciento gyvenimą ir pagerinti jo kokybę.
ŽIV infekcijos diagnozė
ŽIV infekcija įvairiais etapais nustatoma šiais metodais:
- ELISA – fermentų imunologinis tyrimas.
- Western blot.
- PCR – polimerazės grandininė reakcija.
- Greitasis testas.
PGR metodą sukūrė amerikiečių biochemikas Kary Mullis, už jį gavęs Nobelio premiją 1983 m. Šiandien šis metodas medicinoje diagnozuojant visas infekcijas yra laikomas pirmaujančiu dėl savo tikslumo ir informacijos turinio. Šiuo atžvilgiu ŽIV nėra išimtis.
Analizės esmė
Bet kurioje gyvoje ląstelėje yra RNR ir DNR. Šios nukleorūgštys gali savaime kopijuoti ir daugintis. Kiekvienos infekcijos DNR fragmentai yra unikalūs. ATbiologiniuose skysčiuose šie nukleorūgščių fragmentai cirkuliuoja. Juos fiksuoja ir atpažįsta speciali įranga – reaktorius. Tai yra metodo pagrindas. Laborantė šiuos fragmentus suskaičiuoja. Retrovirusas ŽIV stebimas dėl RNR. Net ir naudojant atskiras viruso dalelių kopijas, PGR gali jas aptikti ir suskaičiuoti.
Veninis kraujas dažniausiai naudojamas kaip tiriamasis skystis. Specialūs metodo komponentai jungiasi su viruso dalelėmis ir leidžia jas aptikti, nes rasti fragmentai padauginami.
ŽIV atveju viruso buvimo rezultatas gali būti gautas gerokai prieš atvykstant klinikai. Todėl dėl didelio jautrumo PGR turi tokią didelę diagnostinę vertę. Didžiulis PGR pliusas yra metodo universalumas. Infekcijos inkubacinis laikotarpis PGR nėra kliūtis.
Mokslinių tyrimų kaina
PGR metodas yra gana brangus. Tai vienas iš didžiausių jo trūkumų. Tam reikalinga naujausia įranga ir aukštos kvalifikacijos laborantas. Atsižvelgiant į tai, kas išdėstyta, PGR diagnostika mažose gyvenvietėse neatliekama. Ištirti galite tik specializuotose didelėse klinikose.
ŽIV DNR tyrimo kaina Maskvos klinikose prasideda nuo 2800 rublių, viruso kiekis (viruso RNR plazmoje) nustatomas PGR metodu - nuo 8800 rublių, o atsparumas ŽIV proteazių inhibitoriams - nuo 16 500 rublių. Kaip matote, kainos yra gana didelės. Pagal MHI politiką PGR galima atlikti nemokamai valstybinėse klinikose. Svarbu,kad procedūra gali būti atliekama anonimiškai. Registre pacientas gauna numerį, pagal kurį jis gali sužinoti rezultatą. Šiuolaikiniuose medicinos centruose yra asmeninės klientų sąskaitos, kuriose bus įvedami šie duomenys.
Tyrimo tikslai
ŽIV PGR diagnostika skiriama šiais atvejais:
- Infekcijos aptikimas vaikui, kurį pagimdė serganti motina arba nešiotojas, siekiant nustatyti intrauterinę infekciją.
- Jei ELISA davė abejotinų rezultatų (šiuo atveju PGR ŽIV padeda nustatyti galutinę diagnozę).
- Kad aptiktų kiekybinį viruso kiekį organizme.
- Turėdami teigiamą imunoblotą, jie vienas kitą papildo PGR.
- Tikrinami donorai.
- Ankstyvai ŽIV diagnostikai.
- Nustatyti veiksmingumą ir atsparumą ART.
Šios analizės pranašumas yra tas, kad PGR dėl ŽIV gali būti atlikta net vaikams iki vienerių metų.
Tyrimai dažnai atliekami ne pirminei diagnostikai, o jau gydymo procese. Pirminė diagnostika – serologiniai tyrimai (jie nustato antikūnų prieš ŽIV lygį). Jei klaidingai teigiamas rezultatas kartojasi, tai gali būti dėl mažo viruso kiekio.
PGR diagnozuoja ŽIV, kai dar nėra antikūnų prieš jį. ELISA metodas šiuo atveju neduos atsakymo.
Ir PGR dėl ŽIV jau bus teigiamas. Tačiau šio ŽIV laikotarpio simptomai yra nespecifiniai. Pirmiausia pacientą ilgą laiką ir nesėkmingai nuo ARVI gydo bendrosios praktikos gydytojas. Reikėtų nepamiršti, kad ŽIV diagnozė pagrįsta tikPGR nededamas, būtina atlikti kitus išsamius tyrimus. PGR metodas dažniau yra pagalbinis sunkiais atvejais.
Ruošiamasi analizei
Prieš atliekant PGR dėl ŽIV, likus 2 dienoms iki tyrimo, neturėtumėte valgyti riebaus maisto, alkoholio. Taip pat geriau neįsitempti protiškai ir fiziškai. Jei pacientui skiriamas imunostimuliacijos kursas, jis nutraukiamas likus 2 savaitėms iki analizės.
Kraują geriausia paimti ryte. Galima tirti ir kitus biologinius organizmo skysčius (spermą, makšties sekretą), tačiau kraujas – geriausia medžiaga. Seilės, prakaitas, šlapimas ir ašaros nenaudojamos, nes viruso jose yra minimaliai.
ŽIV PGR pliusai
Metodo privalumai – itin maža klaidingo teigiamo rezultato tikimybė, reakcijos universalumas bet kokiems biologiniams organizmo skysčiams. Analizė turi platų diapazoną:
- Vienas kraujo paėmimas gali būti naudojamas įvairioms infekcijoms nustatyti.
- Technika skubi, rezultatas paruoštas jau kitą dieną.
- Pasitikėjimas yra nuo 85 iki 98%.
- ŽIV buvimą galima nustatyti praėjus 10–14 dienų po užsikrėtimo (šiuo metu antikūnų dar nėra).
- Nėra amžiaus apribojimo, galima atlikti iš karto nuo gimimo.
Metodo trūkumai
PGR trūkumai yra šie:
- Analizės kaina.
- Reikia sudėtingos medicinos įrangos.
- Reikalingas aukštos kvalifikacijos laborantas ir gydytojas,gavėjo analizė.
- Reakcija labai jautri, todėl klaida gali būti 20%.
- Gali gauti klaidingai teigiamą rezultatą, jei pacientas serga autoimuniniais procesais, onkologinėmis ligomis, lėtinėmis infekcijomis.
- Ypatinga laboratorijos patalpų švara būtina, nes virusas į analizę gali patekti iš oro. Tada rezultatas bus neteisingas.
Laboratorijoms, atliekančioms PGR, siekiant pagerinti diagnostikos kokybę, pagal SanPiN sistemą buvo sukurtos specialios griežtos vidaus kontrolės priemonės. Be to, reikia laikytis visų darbo su šia technika taisyklių:
- Reikia griežtai laikytis mėgintuvėliuose pateiktos informacijos.
- Prieš paimdami kraujo mėginius dar kartą pažiūrėkite ir įsitikinkite, kad analizė suplanuota.
- Slaugytoja turi teisingai pažymėti vamzdelius.
- Laborantas turi teisingai atlikti visas manipuliacijas su biomedžiaga, kad būtų išvengta kryžminio užteršimo.
- Bandymo sistema turi būti puikios kokybės.
Tik jei tenkinamos visos šios sąlygos, atsakymo klaida gali būti tik apie 2 % epizodų.
Analizės trukmė
Daugelis domisi, kiek laiko bus parengta ŽIV PGR. Diagnozė trunka ne ilgiau kaip 8 valandas. Atsakymą pacientas gali gauti jau kitą dieną. Greitasis testavimas atliekamas per 2 valandas.
PCR patikimumas
Nepaisant daugelio privalumų, PGR nėra laikomas idealiu diagnostikos metodu. Su juo susisiekiama tuo atvejubūtinybė atlikti atrankos testus, siekiant nustatyti, ar organizme nėra ŽIV.
Kada imamas kraujas analizei?
Kaip ilgai reikia vartoti PGR dėl ŽIV? Patikimą rezultatą galima gauti jau paimant kraują praėjus 4-4 dienoms po tariamos infekcijos. Po 2 savaičių ŽIV patikimumas bus 98%, o per 5 dienas - 80%. Neigiamas ŽIV PGR rezultatas bus patikimas, tačiau norint gauti visiškai tikslų rezultatą, taip pat atliekama ELISA.
ELISA analizė bus efektyvi tik tuo atveju, jei yra viruso antikūnų, šis laikas gali trukti nuo 1-3 mėnesių iki šešių mėnesių. Kadangi ELISA suteikia didesnę tikimybę (98% -99,9%), PGR negalima vadinti 100% patvirtinančiu ŽIV infekcijos buvimo tyrimu. Tačiau, kita vertus, tai yra vienintelis būdas, kai nereikia laukti, kol atsiras antikūnai.
Su ŽIV PGR gali suteikti informacijos apie ART veiksmingumą, ŽIV ligos stadiją ir VN skaičių (kiekybinis ŽIV buvimo organizme įvertinimas). Tai parodys pakeitimo sunkumą ir mastą.
PGR tyrimas dėl ŽIV taip pat būtinas, jei kraujyje yra antikūnų, tačiau jų buvimas nerodo ŽIV infekcijos kliniškai patikimumo.
Jie tikrinami ne tik dėl infekcijos ir atsitiktinio sekso. Kitos progos:
- Planuoja nėštumą.
- Būsima operacija.
- Atsitiktinis seksas.
- Kai kurioms profesijoms reikalingas šis testas norint leisti dirbti (mokytojai, gydytojai ir kitas medicinos personalas).
- Kaliniai.
- TB pacientai.
- Ekstremalių situacijų ministerijos ir policijos darbuotojai.
- Grįžau atostogų iš egzotiškų šalių (jei norite įsitikinti, kad nėra infekcijos).
- Prostitutės.
- Užsienio studentai.
- Narkotikai.
Be to, kai kurie paciento simptomai gali būti priversti atlikti ŽIV testą:
- Staigus svorio kritimas.
- Diarėja, trunkanti ilgiau nei 3 savaites
- Nepagrįstai aukšta temperatūra ilgą laiką.
- Patinę limfmazgiai.
- Nepaaiškinama pneumonijos, kandidozės ir kt. priežastis
Analizės iššifravimas yra gydančio gydytojo, o ne laboranto prerogatyva.
PCR arba ELISA, kas geriau?
Kai PGR diagnozė ŽIV viruso RNR aptinkama tiek kokybiškai, tiek kiekybiškai. Ši analizė aiškiai nustato konkretų patogeną, net jei yra keli kryžmiškai reaguojantys patogenai. Biologinė medžiaga gali būti naudojama net džiovinta. Neigiamas aspektas yra didelis PGR jautrumas, kai klaidingai teigiamą rezultatą gali gauti net nedidelis kiekis svetimos DNR ant instrumentų ar mėgintuvėlio.
ELISA užduotis ir galimybė yra nustatyti retroviruso antikūnų buvimą. Nors jo tikslumas yra 99%, jis netaikomas ankstyvosiose stadijose.
Kokybinis ŽIV tyrimas
Aukštos kokybės PGR dėl ŽIV nustato viruso buvimą organizme. Rezultatai šiuo atveju atrodys taip: teigiami, klaidingai teigiami, neigiami. Tačiau šis tyrimas nepateiks informacijos apie retroviruso kiekį. Tokia kokybinė analizėnetinka, kai ŽIV infekcija organizme jau buvo nustatyta kitomis priemonėmis.
Neįmanoma kontroliuoti gydymo veiksmingumo naudojant aukštos kokybės PGR.
ŽIV kiekybinis nustatymas
Atlieka tik ŽIV užsikrėtę žmonės, siekiant suskaičiuoti viruso RNR kopijų skaičių biologiniame produkte.
Tokio tyrimo tikslas – stebėti vykstantį gydymą ir nustatyti viruso atsparumą jam. Antivirusinis gydymas tokiais skaičiavimais nėra aklai gydytojo paskirtas, todėl jis bus veiksmingesnis. ŽIV infekcijos kiekybinė PGR atliekama daug dažniau. Ši analizė rodoma kaip kraujo kopija/ml.
Kokių rezultatų galima duoti:
- Viruso RNR nėra arba ji labai maža (apie 20 kopijų/ml). Nėra tikrumo dėl diagnozės.
- Nuo 20 - 10 iki 6 laipsnio kopijų / ml - diagnozė patikima.
- Daugiau nei 106 kopijos/ml – didelis VN.
Laboratorijos gali atlikti ŽIV PGR tyrimus realiuoju laiku. Tai reiškia PGR produktų kaupimosi stebėjimą ir skaitinį įvertinimą su automatiniu rezultatų registravimu.
