Kraujo tepinėlio tyrimas yra gana dažnas metodas, leidžiantis greitai diagnozuoti daugelį įprastų sutrikimų. Pagrindinės veiksmingo šio diagnostikos metodo naudojimo sąlygos – griežtas tepinėlio paruošimo technikos laikymasis ir sistemingas tyrimas pagal algoritmą.
Praktikoje toli gražu ne visada įmanoma gauti objektyvių duomenų naudojant greitąją hematologinę diagnostiką. Kraujo tepinėlio tyrimas leidžia palyginti greitai patikslinti ir papildyti gautą informaciją. Šis metodas leidžia nustatyti kai kuriuos elementus, kurie neatsiranda atliekant klinikinius automatizuotus tyrimus, pavyzdžiui, eritrocitų formos pasikeitimą kartu su leukocitų indekso poslinkiu į kairę, ty link nesubrendusio neutrofilo, arba parazitai. Kai kuriais atvejais šis metodas leidžia nustatyti galutinę diagnozę.
Tyrimo algoritmas
Jis kitas:
- Iš karto po mėginio paėmimo reikia greitai įpilti kraujoantikoaguliantų vamzdelis ląstelių kokybei palaikyti.
- Metileno mėlyna dėmė leidžia identifikuoti retikulocitus.
- Vertinimas atliekamas ant plono tepinėlio sluoksnio, mikroskopu nuskaitant jo košelių lygyje.
- Atliekant sisteminį kraujo tepinėlio tyrimą, turimas galvoje APEL algoritmas.
Kam naudojama ši analizė?
Tiems tikslams:
- Kaip nustatyti formos ir dydžio nelygumus, taip pat raudonųjų kraujo kūnelių, trombocitų, b altųjų kraujo kūnelių ir įvairių kraujo kūnelių (įskaitant visas nesubrendusias formas) skaičiaus pokyčius ir jų procentinę dalį.
- Įvairių ligų, susijusių su sutrikusiu išsilavinimu, funkcijomis ar pernelyg dideliu formos elemento sunaikinimu, diagnozei.
- Stebėti ląstelių susidarymą atsižvelgiant į jų brandumo laipsnį sergant leukemija, po spindulinio gydymo, taip pat esant hemoglobino susidarymo sutrikimui.
Kada užsakytas šis tyrimas?
Tuo atveju, kai pagal bendrosios analizės rezultatą ir leukocitų formulę (kuri yra nustatyta pagal plačiausią indikacijų spektrą) nustatomas reikšmingas leukocitų, netipinių ar nesubrendusių ląstelių skaičiaus padidėjimas, tada reikia paimti kraujo tepinėlį. Be kita ko, tokį tyrimą svarbu atlikti daugelyje tokių situacijų:
- Atsižvelgiant į įtariamą ligą, kuri pažeidžia ląsteles.
- Vartodami vaistus, kurie gali turėti įtakos jų gamybai.
Kaip dalisKraujo tepinėlio analizei gydytojai dažniausiai naudoja veninį arba kapiliarinį biologinį skystį.
Pasiruošimas
Kai paimama biomedžiagos, kurios vidutinis skersmuo venos išsiplėtimas, mėginys, kraujas turi greitai tekėti į mėgintuvėlį, kuriame yra antikoaguliantų. Etilendiamintetraacetatas dažnai naudojamas, nes leidžia geriau išsaugoti tiriamą formos elementą. Tiesa, siekiant išvengti įvairių rūšių morfologinių ląstelių degradacijos, laiko tarpas nuo šviežios ir gerai homogenizuotos biomedžiagos paėmimo iki preparato paruošimo turi būti kuo trumpesnis.
Tepinėlių ruošimas prasideda paimant kraujo lašą (paprastai tik vieną iš kapiliarinio vamzdelio) ant mikroskopo stiklelio krašto. Tada jis ištepamas antruoju stiklo elementu, slystančiu per pirmąjį. Gerai paruošto tepinėlio gale yra vadinamasis „katės liežuvis“, rodantis, kad mėginys buvo atliktas teisingai ir leidžia atlikti kokybišką tyrimą.
Dažymas
Dažymas atliekamas standartiniu metodu. Prieš šią procedūrą paruoštas kraujo tepinėlis džiovinamas ore, purtant stiklelį, todėl eritrocitų centre nesusidarys nedažyta šviesos zona. Dėl šios priežasties klaidingas hipochromijos aiškinimas yra atmestas.
Gali būti ir kitų spalvinimo artefaktų. Pavyzdžiui, Wrighto dėmė suteikia nuosėdų. Tai atsitinka, kaidažai po tam tikro laikotarpio nebuvo atnaujinti, stiklelis ilgą laiką buvo beiciniame tirpale arba buvo prastai nuplautas. Dėl to dažų kaupimasis gali būti interpretuojamas kaip parazitų ir bakterijų buvimas kraujyje. Be to, tepinėlio dažymas su ląstelių morfologija gali būti pakeistas kontaktuojant stiklelį formalino garais. Mėginiai dažniausiai dažomi pagal Romanovskio metodą, pagrįstą metileno mėlynuoju ir eozinu.
Klasikinis kraujo tepinėlių dažymas, kaip taisyklė, labai skiriasi nuo greito. Pastaruoju metu tokie metodai turi savo privalumų, nes yra atsparūs tirpalų rūgštingumo pokyčiams ir medžiagos saugyklos susidarymui. Tačiau, nepaisant to, jie yra mažiau veiksmingi nustatant polichromatofilus ir nekeičia bazofilų ir putliųjų ląstelių granulių spalvos.
Norint gauti vizualiai specifinį retikulocitų vaizdą, reikia dažyti nauju metileno mėlynu. Plastikiniuose mėgintuvėliuose kraujo lašas sumaišomas su dviem NBM elementais. Vamzdis dešimčiai minučių paliekamas kambario temperatūroje. Nedidelis lašelis po sumaišymo uždedamas ant stiklelio ir ištepamas taip pat, kaip ir tepinėlio metu. Tada stiklelis greitai išdžiovinamas ore ir tiriamas po mikroskopu dideliu padidinimu.
Sisteminis tyrimas
Atliekant vertinimą labai svarbu vadovautis viena tyrimo schema. Atliekamo kraujo tepinėlio mikroskopijavienas plonas sluoksnis suapvalintu galu, storėja link pagrindo. Ląstelės įvertinamos ant plono piešinio, nes storas turi mažai informacijos. Esant mažam padidinimui, dažniausiai tiriama kraštinė tepinėlio dalis, daugiausia suapvalintas galas, siekiant aptikti trombocitų agregatus arba netipiškas plačias ląsteles (limfoblastus ar dendritinius elementus).
Sluoksnis gali būti zigzago arba košės formos, o tai leidžia aiškiai stebėti įvairias kraujo ląsteles atliekant APEL nukreiptą tyrimą, kur A nurodo kitus netipinius elementus su parazitais, P – trombocitus, E – eritrocitus, o L – apie b altieji kraujo kūneliai.
Kraujo tepinėlio tyrimas yra gana įprastas metodas, leidžiantis greitai diagnozuoti įvairius dažnus sutrikimus. Pagrindinės efektyvaus šio metodo taikymo sąlygos – griežtas tepinėlio tyrimo technikos laikymasis su sistemine analize, laikantis procedūros algoritmo.
Ką reiškia rezultatai?
Pakeitus kraujo tepinėlį ne visada įmanoma nustatyti diagnozę. Paprastai tai rodo tam tikros ligos buvimą, o tai reiškia, kad reikia atlikti tolesnį tyrimą, kad būtų galima nustatyti tikslią diagnozę.
Analizės pagrindimas
Egzistuoja gana didelis spektras ligų, o kartu ir sutrikimų, nuo kurių gali pakisti kraujotakoje cirkuliuojančių ląstelių savybės. Paprastai į šią biomedžiagą iš kaulų čiulpų prasiskverbia tik subrendę elementai,tačiau esant daugeliui patologijų, pavyzdžiui, sergant leukemija, į jį gali patekti nesubrendusių analogų blastų pavidalu. Kai kurių ligų atveju, pavyzdžiui, esant masinėms infekcijoms, leukocituose gali atsirasti būdingų priemaišų, pačios ląstelės tampa netipinės, kaip, pavyzdžiui, sergant infekcine mononukleoze.
Trūkstant geležies arba vitamino B12, esant įgimtam hemoglobino sintezės sutrikimui, gali pakisti raudonųjų kraujo kūnelių savybės ir išvaizda. Tokių patologinių ląstelių aptikimas per didelį kiekį tepinėlyje leidžia įtarti jas sukėlusią patologiją ir pacientui skirti papildomą tyrimą. Kraujo tepinėlis gali būti reguliariai skiriamas žmonėms, sergantiems kaulų čiulpų ar limfmazgių onkologinėmis ligomis, stebint gydymo dinamiką ir veiksmingumą.
