Hepatitas C yra kepenų infekcija, kurią sukelia Flaviviridae HCV virusas, kurį sudaro viena ar daugiau RNR molekulių. Paprastai, siekiant nustatyti paciento hepatitą C, imamasi daugybės diagnostinių priemonių. PGR yra analizė, kuri tiksliai patvirtina diagnozę. Dažnai išvadą gydytojai pateikia, kai pacientas jau turi pirmuosius ligos požymius.
Kas yra hepatitas C
Kepenų pažeidimas dėl virusinės infekcijos, perduodamos per kraują arba lytiniu būdu, medicinoje vadinamas hepatitu C. Sukėlėjas yra RNR turintis neląstelinių infekcinių ligų sukėlėjų, priklausančių Flaviviridae šeimai, virusas. Infekcija gali likti organizme ilgą laiką nepasireikšdama. Todėl tik tada, kai mikroorganizmas aptinkamas kraujo tyrimu, naudojant PGR RNR RNR, hepatitas C (kaip diagnozė) laikomas pagrįstu.
Flavivirusas nėra gaminamas dirbtinai išaugintose izoliuotose ląstelėse. Dauginimosi procese infekcijos sukėlėjas sukuria imunologiškai skirtingas modifikacijas. Šie veiksniai neleidžia organizmui duotitinkamą apsauginį atsaką, o ekspertams sunku sukurti veiksmingą vakciną.
Virusas perduodamas parenteriniu būdu. Užsikrėtus pakankamu kiekiu jo turi patekti tiesiai į kraują.
Kokie tyrimai atliekami dėl hepatito C
Virusinės kepenų patologijos diagnozuojamos naudojant laboratorinius tyrimus. Klinikiniai hepatito C tyrimai atliekami tiriant svetimus ir pavojingus antigenus arba b altymų junginius (antikūnus) paciento biomedžiagoje, daugiausia kraujyje.
- Fermentinis imuninis tyrimas (ELISA). Metodas pagrįstas lgM antikūnų aptikimu kraujyje. Imunoglobulinas laikomas didžiausiu ir yra pentameras. Jis pasireiškia pirminiu apsauginiu limfocitų atsaku į nežinomą svetimą medžiagą.
- Radioimunoanalizė (RIA) – kiekybinis lgM imunoglobulino nustatymas naudojant pažymėtą radioaktyvų jodo izotopą.
- Hepatito C PGR – virusinės RNR nustatymas biomedžiagoje (kraujyje). Ši analizė patikimai patvirtina diagnozę.
IgG tyrimas nėra patikimas. Jo buvimas kraujo serume gali rodyti ne tik flaviviruso buvimą, bet ir kitą praeitą infekciją, turinčią tą patį patogeną.
Kas lemia PGR analizę
Polimerazės grandininė reakcija (PGR) pagrįsta tam tikriems patogenams specifinių DNR sričių identifikavimu tyrimams skirtos medžiagos mėginiuose (epiteliu, krauju). Analizė leidžia nustatyti patogeninius mažiausius organizmus (virusus), aptikus jų RNR arba DNR biologinėje medžiagoje.
Laboratorinė procedūra, skirta antikūnams nustatyti hepatito C PGR atliekama 3 etapais:
- Pasirinkite. Tirta biomedžiaga išvaloma nuo priemaišų, o DNR gaunama judriojoje chromatografinės kolonėlės fazėje.
- Pastiprinimas. Analizė atliekama įrenginio-termostato cikle. Jis tam tikru cikliškumu šildo ir aušina mėgintuvėlius. Vienam tyrimui atliekama iki 35 ciklų. Rezultatas – pakankamas DNR fragmentų skaičius patogenui aptikti, identifikuoti ir įvertinti.
- Elektroforezė. Gauti fragmentai dedami į gelį su skirtingu agarozės prisotinimu ir atliekama elektroforezė. Gauta elektroferograma analizuojama kompiuteriu.
Naudojamas ne tik standartinis PGR tyrimas, bet ir realaus laiko PGR analizė. Tai realaus laiko diagnostika. Metodas leidžia atlikti kokybinę ir kiekybinę analizę, kuri leidžia nustatyti ligos formavimąsi ir dinamiką, taip pat paskirti terapiją, kuria siekiama pašalinti patologijos atsiradimo priežastį. Realaus laiko PGR taip pat naudojamas grynai infekcinių agentų kultūrai nustatyti (genotipui nustatyti).
Kaip atliekamas polimerazės grandininės reakcijos testas
Diagnostikai gali būti naudojamas bet koks žmogaus biologinis skystis. Hepatito C tyrimo biomedžiaga paprastai yra kraujas.
Mėginių ėmimas diagnostikai atliekamas procedūriniu būdubiuras. Norėdami paimti kraują, naudokite vienkartinius mėgintuvėlius su medžiaga, kuri stabdo kraujo krešėjimą. Užkrečiamųjų ligų sukėlėjų plitimo prevencijai skirta veikla padeda išvengti kitos mikroorganizmų padermės patekimo iš išorės.
Hepatito C PGR kraujas imamas ryte tuščiu skrandžiu. Mėginys nedelsiant siunčiamas į laboratoriją. Biomedžiagą leidžiama laikyti nuo +4 iki +8 laipsnių Celsijaus temperatūroje. Talpyklos yra paženklintos etiketėmis ir pateikiamos su nuorodomis. Bandymo rezultatai pasiekiami per 48 valandas, kartais anksčiau.
PGR tipai
Polimerazės grandininės reakcijos taikymo sritis yra gana plati. Infekcionistai PGR būdu nustato hepatitą B, kraujasiurbių vabzdžių platinamas ligas, AIDS, tuberkuliozę. Onkologijoje, naudojant šį metodą, naviko ląstelės aptinkamos ankstyvoje stadijoje.
Yra apie keturiolika analizės tipų. Vieno ar kito tipo naudojimas priklauso nuo tyrimų apimties ir galutinių rezultatų. Kai kurios PGR rūšys yra būtinos, kai rezultato reikia gauti per 20 minučių.
Hepatitui C diagnozuoti naudojamos 3 polimerazės grandininės reakcijos rūšys:
- Kokybinis įvertinimas gali būti teigiamas, nurodantis, kad organizme yra infekcija, arba neigiamas, nurodantis, kad flaviviruso nėra.
- Realiojo laiko PGR (kiekybinė analizė) – nustato kiekybinę patogeno RNR TV/ml.
- Genotipų nustatymas yra analizė, kuri atskleidžia viruso tipą (genotipą).
Norėdami tiksliai nustatyti ir nustatyti ligą, po tovisų trijų tipų tyrimai naudojami optimaliam gydymui skirti.
Kokybinė polimerazės grandininės reakcijos analizė
Analizė yra privaloma visiems, kuriems atliktas ELISA tyrimas, aptikęs antikūnų prieš HCV. Kokybinis hepatito C PGR yra standartinis jautrumo testas. Metodas skirtas tik aptikimui, kitų medžiagų skaičiavimas ar išskyrimas neatliekamas.
Antikūnams aptikti naudojamos specialios tyrimo sistemos, kurių jautrumo slenkstis yra ne mažesnis kaip 50 TV/ml. Jei aptinkami antikūnai, skiriami kiti patikslinantys tyrimai. Jei rezultatas neigiamas, tolesni tyrimai nebus atliekami.
Kai kuriais atvejais klaidingai neigiamas rezultatas gali būti dėl nekompetentingo laboratorijos personalo arba prastos kokybės reagentų. Draudimui geriau analizę atlikti kitur.
Kiekybinė PGR
Šis metodas naudojamas tiesiogiai tirti flavivirusų skaičių viename reakcijos cikle. Tiksliems matavimams naudojami hibridizacijai naudojami DNR fragmentai arba fluorescenciniu būdu pažymėti pradmenys. Yra ekonomiška aptikimo parinktis naudojant SYBL Green dažus. Dažai yra įsprausti į mažą DNR griovelį ir, apšvitinant lazeriu, tampa mėlyni.
Koncentraciją nustato aparatas-stiprintuvas skaitmeniniu ekvivalentu. Vertės įvairiose laboratorijose gali šiek tiek skirtis, todėl jas reikia palyginti su pamatinėmis vertėmis.
Kiekybinė PGRhepatitas C padeda parinkti optimalias vaistų dozes ir nustatyti gydymo trukmę. Tyrimo dažnumas priklauso nuo ligos stadijos, genotipo tipo ir paskirto gydymo kurso.
Genotipo nustatymas
Hepatito C viruso genetinė sandara yra kintama. Dėl daugybės modifikacijų neįmanoma sukurti vakcinos, taip pat apsunkina gydymą. Iš viso nustatyta ir užregistruota 11 genotipų ir 100 potipių. Buvusios SSRS šalyse asmenims, užsikrėtusiems hepatitu C, PGR daugiausia aptinka 1b ir 3 genotipus.
Esant bet kuriam genotipui, cirozė arba kepenų vėžys gali šėlti. Štai kodėl labai svarbu laiku aptikti virusą.
Kai kuriems pacientams tam tikri vaistai, skirti kovai su HCV, yra toksiški. Genotipų nustatymas leidžia nustatyti b altymų rūšį ir paskirti veiksmingą vaistą.
Tipavimo testų rezultatuose yra skaičius su mažąja lotyniška raide, nurodantis viruso genotipą. Jei HCV yra aptiktas, bet nenustatytas, tai reiškia, kad asmens genotipas nebūdingas tam tikrai geografinei vietovei.
Analizės rezultatai
Gydytojas užsiima rezultatų iššifravimu. Tik kelių tyrimų duomenys (kartu su anamneze ir tyrimais) gali pateikti bendrą tikrą ligos istorijos vaizdą.
- Sveiko žmogaus kokybinės reakcijos biomedžiagoje tyrimas nieko neaptinka. Jei nurodoma reikšmė „aptikta“, infekcija patvirtinama, o pacientasreikia papildomos diagnozės ir gydymo.
- Infekcinių sukėlėjų skaičiaus nustatymas leidžia įvertinti virusų kiekį organizme. Paprastai hepatito C kiekybinė PGR neaptinka patogeno. Rodiklis iki 810^5 laikomas mažu krūviu ir, tinkamai gydant, garantuoja palankų rezultatą. Didesnės vertės reikalauja nuodugniai ištirti ir nustatyti ilgalaikį gydymą, kurio teigiamo rezultato niekas negali garantuoti.
- Teigiami genotipų nustatymo rezultatai rodo, kuris genotipas atpažįstamas. Neigiamas rezultatas rodo, kad flaviviruso nėra, arba yra genotipas, kuris nėra būdingas šiam regionui.
Ką rodo teigiamas PGR testas
Bet kokia rimta liga reikalauja išsamios diagnozės. Teigiamas hepatito C PGR patvirtina diagnozę, tačiau prognozuoti galima tik atlikus papildomus laboratorinius ir instrumentinius tyrimus.
Viruso aptikimas nesuteikia išsamaus patologijos vaizdo. Būtina nustatyti jo tipą ir pobūdį, nustatyti, kaip jis veikia kepenis ir kitus organus. Ankstyvas HCV nustatymas dažnai turi teigiamą terapinį rezultatą.
Neigiamas PGR su teigiamu ELISA
Stebint kepenų pažeidimui būdingus simptomus, didelė tikimybė, kad infekcija jau pateko į organizmą. Todėl turėtumėte kreiptis į hepatologą arba infekcinių ligų specialistą. Pokalbių metu specialistas surinks anamnezę ir paskirs reikiamą tyrimą.
Jeihepatito C PGR tyrimų rezultatai yra neigiami, o fermentų imunologinis tyrimas – teigiamas, tai rodo, kad kraujyje yra antikūnų prieš flavivirusą. Dažniausiai taip nutinka, kai infekcija į organizmą patenka nedideliu kiekiu, todėl imuninė sistema su ja susitvarkė pati. Tačiau tokie žmonės vis tiek laikomi užsikrėtusiais ir privalo būti tikrinami kas 6 mėnesius. Jei su tokiais tyrimo rezultatais žmogui atsisakoma nemokamai atlikti medicininę apžiūrą, geriau už mokestį atlikti PGR, kad būtų išsaugota sveikata, o jei rezultatai teigiami, kreipkitės į specialistą dėl diagnozės ir gydymo.
Metodo privalumai ir trūkumai
Nustatant hepatito C diagnozę, PGR turi keletą privalumų:
- Ankstyvas patogeno nustatymas.
- Tikslus viruso apibrėžimas.
- Diagnostikos efektyvumas.
- Mažiausias klaidų lygis.
- Didelis jautrumas.
Metodo trūkumai:
- Didelė analizės kaina. Tyrimui atlikti reikalinga brangi įranga, reagentai ir aukštos kvalifikacijos medicinos personalas. Visi kartu sudaro nemažą sumą.
- Griežti reikalavimai biomedžiagos transportavimui.
Kepenų uždegimo gydymas
Hepatito C viruso PGR analizė laikoma pagrindine diagnozuojant, bet ne galutine. Kad terapija būtų veiksminga, reikia atlikti daugybę papildomų laboratorinių ir instrumentinių tyrimų. Perėjus visusdiagnostikos priemones gydytojas skiria gydymą:
- Nurašyta dieta Nr.5.
- Alkoholis visiškai neįtrauktas.
- Bendras interferono ir ribavirino priėmimas 25 dienas.
- Hepaprotektorių kursai „Essentiale“, „Karsil“, „Phosphogliv“.
- Ypatingais atvejais naudojama atskira plazmaferezė.
Hepatologo paskirti vaistai vartojami reguliariai, nekeičiant dozių. Vaistų vartojimo trukmę nustato gydytojas, išlaikęs kontrolinius testus. Baigę gydymo kursą, turite apsilankyti pas gydytoją kas šešis mėnesius.
PGR diagnostika leidžia ankstyvoje stadijoje nustatyti hepatito C sukėlėją. Tai prisideda prie gydymo veiksmingumo ir ligos perėjimo į tokias pavojingas formas kaip cirozė ir kepenų ląstelių karcinoma prevencijos.
